细胞检测（细胞周期检测方法及原理）

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流式细胞术基本概念文章源自略懂百科-http://wswcn.cn/100257.html

流式细胞术（Flow Cytometry）是对于处在快速直线流动中的细胞和生物颗粒进行多参数、快速的定量分析和分选技术，研究对象为生物颗粒，如各种细胞、微生物及人工合成微球等，对生物颗粒的物理参数及生物学特性进行定性和定量分析的一种方法。文章源自略懂百科-http://wswcn.cn/100257.html

图1 流式细胞仪外观例图文章源自略懂百科-http://wswcn.cn/100257.html

2.流式细胞仪四大系统文章源自略懂百科-http://wswcn.cn/100257.html

流式细胞仪主要由四部分组成，它们是：流动室与液流驱动系统、激光光源及光束成形系统、光学系统、信号检测与分析系统，下图为其结构示意图。文章源自略懂百科-http://wswcn.cn/100257.html

图2 流式细胞仪构造图文章源自略懂百科-http://wswcn.cn/100257.html

流动室与液流驱动系统：流动室由样品管、鞘液管和喷嘴等组成，常用光学玻璃、石英等透明、稳定的材料制作。设计和制作均很精细，是液流系统的心脏。样品管贮放样品，单个细胞悬液在液流压力作用下从样品管射出；鞘液由鞘液管从四周流向喷孔，包围在样品外周后从喷嘴射出。为了保证液流是稳液，一般限制液流速度υ<10m/s。由于鞘液的作用，被检测细胞被限制在液流的轴线上。流动室上装有压电晶体，受到振荡信号可发生振动。文章源自略懂百科-http://wswcn.cn/100257.html

图3 流动室与液流驱动系统文章源自略懂百科-http://wswcn.cn/100257.html

激光光源及光束成形系统：经特异荧光染色的细胞或者物质需要合适的光源照射激发才能发出荧光供收集检测。常用的光源有弧光灯和激光；激光器又以氩离子激光器为普遍。文章源自略懂百科-http://wswcn.cn/100257.html

光学系统：光源的选择主要根据被激发物质的激发光谱而定。汞灯是最常用的弧光灯，其发射光谱大部分集中于300～400nm，很适合需要用紫外光激发的场合。氩离子激光器的发射光谱中，绿光514nm和蓝光488nm的谱线最强，约占总光强的80%；氪离子激光器光谱多集中在可见光部分，以647nm较强。为了进一步使检测的发射荧光更强，并提高荧光讯号的信噪比，在光路中还使用了多种滤片。带阻或带通滤片是有选择性地使某一滤长区段的光线滤除或通过。文章源自略懂百科-http://wswcn.cn/100257.html

荧光名称文章源自略懂百科-http://wswcn.cn/100257.html

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PE-cy7文章源自略懂百科-http://wswcn.cn/100257.html

VioBlue文章源自略懂百科-http://wswcn.cn/100257.html

APC-H7文章源自略懂百科-http://wswcn.cn/100257.html

Alexa 700文章源自略懂百科-http://wswcn.cn/100257.html

PE文章源自略懂百科-http://wswcn.cn/100257.html

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APC-Cy7文章源自略懂百科-http://wswcn.cn/100257.html

Percy-efluor文章源自略懂百科-http://wswcn.cn/100257.html

efluor506文章源自略懂百科-http://wswcn.cn/100257.html

FITC文章源自略懂百科-http://wswcn.cn/100257.html

Efluor660文章源自略懂百科-http://wswcn.cn/100257.html

7-AAD文章源自略懂百科-http://wswcn.cn/100257.html

Efluor450文章源自略懂百科-http://wswcn.cn/100257.html

APC-efluor780文章源自略懂百科-http://wswcn.cn/100257.html

APC文章源自略懂百科-http://wswcn.cn/100257.html

PerCP文章源自略懂百科-http://wswcn.cn/100257.html

EGFP文章源自略懂百科-http://wswcn.cn/100257.html

APC-Vio770文章源自略懂百科-http://wswcn.cn/100257.html

APC-R700文章源自略懂百科-http://wswcn.cn/100257.html

PerCP-cy55文章源自略懂百科-http://wswcn.cn/100257.html

表1 常见荧光名称文章源自略懂百科-http://wswcn.cn/100257.html

信号检测与分析系统：经荧光染色的细胞受合适的光激发后所产生的荧光是通过光电转换器转变成电信号而进行测量的。光电倍增管（PMT）最为常用。PMT的响应时间短，仅为ns数量级；光谱响应特性好，在200～900nm的光谱区，光量子产额都比较高。流式细胞计中一般备有两类放大器。一类是输出信号辐度与输入信号成线性关系，称为线性放大器。线性放大器适用于在较小范围内变化的信号以及代表生物学线性过程的信号，例DNA测量等。另一类是对数放大器，输出信号和输入信号之间成常用对数关系。在免疫学测量中常使用对数放大器。文章源自略懂百科-http://wswcn.cn/100257.html

3.流式细胞术检测范围文章源自略懂百科-http://wswcn.cn/100257.html

（1）细胞功能文章源自略懂百科-http://wswcn.cn/100257.html

（2）细胞表面、胞浆、核的特异性抗原文章源自略懂百科-http://wswcn.cn/100257.html

（3）细胞活性文章源自略懂百科-http://wswcn.cn/100257.html

（4）细胞内细胞因子文章源自略懂百科-http://wswcn.cn/100257.html

（5）酶活性文章源自略懂百科-http://wswcn.cn/100257.html

（6）细胞受体文章源自略懂百科-http://wswcn.cn/100257.html

（7）细胞内钙离子文章源自略懂百科-http://wswcn.cn/100257.html

图4 流式样本检测范围文章源自略懂百科-http://wswcn.cn/100257.html

4.常见流式细胞术检测应用文章源自略懂百科-http://wswcn.cn/100257.html

细胞周期文章源自略懂百科-http://wswcn.cn/100257.html

细胞胞内因子文章源自略懂百科-http://wswcn.cn/100257.html

流式绝对计数文章源自略懂百科-http://wswcn.cn/100257.html

细胞凋亡文章源自略懂百科-http://wswcn.cn/100257.html

6~10色T细胞亚群免疫分型文章源自略懂百科-http://wswcn.cn/100257.html

细胞表型分析文章源自略懂百科-http://wswcn.cn/100257.html

细胞增殖文章源自略懂百科-http://wswcn.cn/100257.html

活化T细胞因子文章源自略懂百科-http://wswcn.cn/100257.html

中性粒细胞呼吸爆发文章源自略懂百科-http://wswcn.cn/100257.html

线粒体膜电位变化文章源自略懂百科-http://wswcn.cn/100257.html

胞内PH值测定文章源自略懂百科-http://wswcn.cn/100257.html

胞内蛋白磷酸化文章源自略懂百科-http://wswcn.cn/100257.html

全血TBNK细胞文章源自略懂百科-http://wswcn.cn/100257.html

Th1/Th2/Th17细胞亚群的免疫分型文章源自略懂百科-http://wswcn.cn/100257.html

T细胞Th极性分析文章源自略懂百科-http://wswcn.cn/100257.html

调节性T细胞Treg文章源自略懂百科-http://wswcn.cn/100257.html

流式液相多因子检测文章源自略懂百科-http://wswcn.cn/100257.html

巨噬细胞吞噬功能文章源自略懂百科-http://wswcn.cn/100257.html

调节性B细胞Breg文章源自略懂百科-http://wswcn.cn/100257.html

细胞内钙流测定文章源自略懂百科-http://wswcn.cn/100257.html

流式MDSC检测文章源自略懂百科-http://wswcn.cn/100257.html

表2 常见流式细胞术应用文章源自略懂百科-http://wswcn.cn/100257.html

图5 流式细胞术科研应用方向（1）文章源自略懂百科-http://wswcn.cn/100257.html

图6 流式细胞术科研应用方向（2）文章源自略懂百科-http://wswcn.cn/100257.html

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